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摘要:本文為了研究質粒中內毒素的含量是否符合要求,使用鱟試劑動態顯色法對公司提供的質粒進行內毒素含量的檢測。依據《中國藥典》2015年版三部通則中細菌內毒素檢測法的規定,建立了質粒中細菌內毒素含量檢測方法,通過對內毒素標準品不同濃度下反應時間的測定制備了標準曲線,再將供試品稀釋至不同濃度來進行檢測,OD值(吸光度)設定為0.2,啟動時間的對數與所測內毒素濃度的對數成線性關系,根據之前內毒素標準品繪制出的標準曲線,來定量檢測供試品中的內毒素濃度,最終可以計算出內毒素含量,當內毒素含量大于0.01Eu/μg時,不合格;當內毒素含量小于0.01Eu/μg時,合格。在分析實驗數據時,與凝膠法進行了對比,所得數值與凝膠法現象:全凝,半凝,不凝基本一致。可以看出動態顯示法在對內毒素進行定量檢測時優于凝膠法,比較精確。 【關鍵詞】:動態顯色法, 鱟試劑, 內毒素, 靈敏度
目錄 摘要 Abstract 1 前 言-1 1.1 細菌內毒素檢查法的研究歷史-1 1.2 細菌內毒素的定義結構和危害-1 1.3 內毒素檢查方法的分類-2 2 材料與方法-4 2.1 主要儀器與試劑-4 2.1.1 主要試劑-4 2.1.2 主要儀器-4 2.2 實驗方法-4 2.2.1 動態顯色法測定儀器的設定 -4 2.2.2 內毒素標準溶液配制-4 2.2.3 內毒素標準品的配置-4 2.2.4 鱟試劑的溶解-5 3 結果與分析-6 3.1 內毒素濃度對吸光度的影響-6 3.2 標準曲線的繪制-6 3.3 檢測質粒濃度是否合格-8 3.4 與凝膠法進行對比-9 4 結 論-11 參考文獻-12 致謝-14 附錄-15 |