摘要：食品安全問題成為越來越多人關注的話題，肉質摻假更是經常出現，建立一種快速、特異、靈敏度高的動物源性成分檢測方法變得很有必要。本研究以線粒體12S rRNA 基因序列為目標，設計特異性引物，以羊肉、豬肉、雞肉、鴨肉為研究對象，提取肌肉組織DNA，進行PCR擴增，對擴增產物進行凝膠電泳檢測和DNA測序分析。結果表明，羊、豬、雞、鴨的12S rRNA基因片段大小依次為440 bp、440 bp、438 bp和438 bp；羊肉、豬肉、雞肉和鴨肉的12S rRNA基因片段測序均為單峰圖，羊肉與豬肉混合樣本、羊肉與雞肉混合樣本和羊肉與鴨肉混合樣本的12S rRNA基因片段測序均為重疊峰圖，測序出現重疊峰圖說明檢測到摻雜的肉樣。因此，本研究建立的實驗方法能夠有效地檢測羊肉中的摻假。

關鍵詞︰羊肉；PCR-SSCP；12S rRNA基因；摻假

目錄

摘要

Abstract

引言-1

1 材料與方法-2

1.1 實驗材料-2

1.1.1 DNA提取試劑-2

1.1.2 瓊脂糖凝膠電泳試劑-2

1.1.3 PCR-SSCP分析試劑-2

1.2實驗儀器-3

1.3 DNA提取-3

1.3.1 組織樣品的處理-3

1.3.2 細胞裂解-3

1.3.3 酚/氯仿法抽提-4

1.3.4 乙醇沉淀-4

1.3.5 DNA的溶解與保存-4

1.4 PCR引物擴增及檢測-4

1.5 PCR-SSCP分析-5

1.5.1 電泳裝置的準備-5

1.5.2 制膠、灌膠、裝膠-6

1.5.3 電泳-6

1.5.4 沖洗-6

1.5.5 染色和顯色-6

1.6 DNA測序及數據分析-6

2 結果與分析-7

2.1 12S rRNA基因片段的PCR擴增與檢測結果-7

2.2 PCR-SSCP分析及測序結果分析-7

3 討論-11

4 參考文獻-14

5 附錄-16