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      超聲波提取硅膠柱分離王不留行中總皂苷_制藥工程.doc

      資料分類:醫藥學院 上傳會員:lovefish 更新時間:2015-03-03
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      摘要:目的: 對王不留行中抗腫瘤新生血管皂苷類活性物質進行提取與分離的工藝優化。

      方法:以齊墩果酸為對照品,分光光度法測定王不留行中總皂苷含量;以王不留行干粉得率和總皂苷含量為評價指標,選取提取次數,料液比,乙醇濃度,超聲時間,超聲功率五個實驗因素對超聲波提取王不留行總皂苷的工藝進行優化;根據TLC分離結果初步得出較優的洗脫劑配比,對超聲波提取所得粗皂苷進行硅膠柱分離;SRB法檢測總皂苷的活性。

      結果:超聲波提取較優工藝條件為:以料液比為1:15、乙醇濃度為70%、超聲時間為40min、超聲功率為80%,提取兩次時提取效果最好;硅膠柱層析較優分離條件為:流速為0.8mL/min,上樣量與硅膠量比值為1:210,上樣量與拌樣硅膠量比值為1:10,以氯仿:甲醇:水(14:4:1,65:35:10,14:14:3)進行梯度洗脫,洗脫效果較好,分離得到的含皂苷干粉得率為56.88%,干粉中總皂苷含量為16.11%,總皂苷樣品的IC50值為4.41μg/ml。

      結論:本研究中所得工藝中王不留行總皂苷的得率較高,活性較好

       

      目錄

      摘要

      ABSTRACT

      第1章 緒論-1

      1.1抗腫瘤藥物的研究進展-1

      1.1.1腫瘤新生血管的概述-1

      1.1.2腫瘤血管生成抑制劑的介紹-1

      1.2王不留行的研究-2

      1.3 三萜皂苷的研究-3

      1.4 超聲波提取概述-4

      1.4.1超聲波提取的原理-4

      1.4.2 超聲波提取的特點-5

      1.5 硅膠柱層析概述-6

      1.6 研究意義-6

      1.7 研究框架-7

      第2章 材料與實驗方法-9

      2.1 藥品試劑及儀器-9

      2.1.1 材料-9

      2.1.2 實驗儀器-9

      2.1.3實驗試劑-9

      2.2 實驗方法-9

      2.2.1實驗前期準備-9

      2.2.2分光光度法測定王不留行中總皂苷含量方法的建立-10

      2.2.3干粉得率的測定-10

      2.2.4單因素實驗-10

      2.2.5正交實驗與驗證實驗-10

      2.2.6 TLC選擇洗脫劑的配比-11

      2.2.7硅膠柱層析實驗-11

      2.2.8 SRB法測定細胞活性-12

      第3章 結果與分析-13

      3.1分光光度法測定王不留行中總皂苷含量方法的建立結果-13

      3.2 超聲波提取實驗結果-13

      3.2.1 提取次數單因素實驗結果-13

      3.2.2 料液比單因素實驗結果-14

      3.2.3乙醇濃度單因素實驗結果-14

      3.2.4超聲時間單因素實驗結果-15

      3.2.5 超聲功率單因素實驗結果-16

        3.2.6 超聲波提取正交實驗結果-16

        3.2.7超聲波提取工藝驗證實驗結果-17

      3.3 TLC洗脫劑配比考察結果-17

      3.4硅膠柱層析分離王不留行總皂苷實驗結果-18

      3.5細胞活性評價結果-19

      第4章 結論與展望-21

      4.1 結論-21

      4.2 不足之處與展望-21

      參考文獻-23

      致 謝-25

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