摘要:蝦青素除具有一般類胡蘿卜素的化學性質外，還具有優良的抗氧化性，其脂溶性自由基猝滅功能的活力是β-胡蘿卜素的10倍、維生素E的 100倍，在食品添加劑、水產養殖、化妝品、保健品和醫藥工業方面有廣闊的應用前景。蝦青素主要有兩種產品，即人工合成蝦青素和天然蝦青素。受綠色波的沖擊，人工合成蝦青素的應用受到了較大限制；而從生物體內提取的天然蝦青素大多為反式結構，使用安全且生物效價高，具有良好的發展前景。目前天然蝦青素的來源主要是：利用藻類和微生物發酵生產以及從水產品加工工業的廢棄物中提取。雖然微藻中蝦青素含量很高，但目前離大規模生產尚有一定距離；而蝦殼等甲殼類副產品，雖然其蝦青素含量較低，但沿海、沿湖地區的蝦仁加工業的下腳料蝦頭、蝦殼資源十分豐富，因此探索經濟可行的回收蝦青素的方法，對環保及資源的綜合利用具有重要的意義。

本文研究了從蝦殼中提取純化蝦青素的工藝。該工藝包括蝦青素酶法的提取、有機溶劑提取、冷凍提取和蝦青素的皂化、柱層析等純化方法，從而提高蝦青素在樣品中的含量。本實驗首先采用了木瓜蛋白酶對樣品進行水解，最佳酶解工藝條件為：固液比為l：2，酶解溫度48．5 ℃，酶解pH值5.8，水解時間63 min，酶與底物比為2522 U／g。

其次研究了影響蝦青素皂化結果的因素，創新性的對皂化時加入堿溶液的量的多少進行了研究。結果表明在KOH-CH3CH2OH溶液濃度為40 g/L、實驗溫度為20 ℃、皂化時間為20 min、在樣品本身酸度的條件下，皂化效果最好。

還研究了聚酰胺固定相及洗脫劑對產品純度的影響，結果表明隨著二氯甲烷和正己烷混合溶劑中二氯甲烷比例的增加，聚酰胺柱洗脫得到的產品純度提高。

從新鮮蝦殼中提取的粗色素油，蝦青素含量約0.0065％，經過蝦青素酯的水解、聚酰胺柱的吸附分離得到的產品中蝦青素含量有很大提高，部分產品蝦青素含量可達約10％-20%，可滿足部分市場需求。

關鍵詞：蝦青素；皂化；聚酰胺柱層析；木瓜蛋白酶；二氯甲烷

目錄

摘要

ABSTRACT

第1章 緒論-1

1.1 蝦青素-1

1.1.1 分子式、分子量和結構式-1

1.1.2 物理化學性質-1

1.1.3 存在形式-2

1.1.4 來源-2

1.1.5 生物活性及工業價值-3

1.2 蝦青素的提取和精制方法-5

1.2.1 從蝦廢料中提取蝦青素-5

1.2.2 通過藻類提取蝦青素-6

1.2.3 利用紅發夫酵母生產蝦青素-7

1.2.4 化學合成-7

1.2.5 其它方法-7

1.3 國內外天然蝦青素的產業化現狀-7

1.4 研究內容-8

第2章 實驗材料和方法-9

2.1 實驗材料-9

2.2 實驗試劑-9

2.3 實驗設備-9

2.4 蝦青素的提取方法-10

2.4.1 酶解-10

2.4.2 有機溶劑提取-10

2.4.3冷凍除雜-10

2.4.4 樣品皂化-10

2.4.5 柱層析-11

2.5 蝦青素的分析與表征-11

2.5.1 質譜-11

2.5.2 全波長掃描-12

2.5.3 高效液相色譜法-12

2.5.4 蝦青素含量-12

2.5.5 蝦青素的回收率和提取量-12

第3章 結果與分析-13

3.1 蝦殼的酶解預處理-13

3.2 二氯甲烷提取法提取蝦青素-13

3.3 蝦青素粗提物的冷凍除雜-13

3.3.1 溫度的影響-13

3.3.2 全波長掃描結果-14

3.4 蝦青素粗提物的皂化-14

3.4.1 KOH濃度對皂化效果的影響-14

3.4.2皂化溫度對皂化效果的影響-14

3.4.3 皂化時間對皂化效果的影響-15

3.4.4 用最優工藝皂化樣品后蝦青素的含量和回收率-15

3.5 柱層析法分離純化蝦青素-15

3.5.1 酶標儀測吸光度-15

3.5.2 蝦青素的液相分析-16

3.5.3 質譜分析結果-17

3.5.4 柱層析分離得到的蝦青素的含量與回收率-17

第4章 結論與展望-19

4.1 主要結論-19

4.2 不足之處與展望-19

參考文獻-21

致  謝-23