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摘要:樟芝為臺灣特有的天然藥用真菌,具有廣泛的生物活性,如保肝、抗乙型肝炎、抗癌、抗氧化性、抗炎癥等。野生樟芝資源嚴重短缺,采用生物技術方法液態發酵培養樟芝菌絲體是目前最經濟、最符合環保要求的方法。本研究前期研究發現樟芝發酵后期會產生數量較多的無性孢子,因此本論文進一步嘗試利于孢子作為接種物,研究樟芝快速循環發酵工藝。 首先,研究了樟芝無性孢子的保存方法。通過研究比較了無菌水、20%蔗糖、20%海藻糖、15%甘油4種不同保護劑在不同溫度條件下對孢子的保護效果。發現15%甘油有助于孢子的短期保藏,為孢子接種物的制備工藝奠定了研究基礎。 其次,比較了斜面接種和孢子接種兩種不同接種方式下的分批發酵,證明孢子接種具有使發酵過程可控性高,菌體生長均勻的優勢。 最后,在以孢子為接種物分批發酵的基礎上,建立了樟芝快速循環發酵工藝,克服了傳統發酵工藝周期長,易染菌等問題,提高了生產強度。 關鍵詞:樟芝;孢子保藏;發酵工藝
目錄 摘要 ABSTRACT 第1章 緒論-1 1.1 立題背景及意義-1 1.2 國內外研究現狀-1 1.2.1 樟芝簡介-1 1.2.2 國內外研究-2 1.2.3 本實驗室前期研究-3 1.3 本課題的主要任務和目標-3 第2章 材料與方法-5 2.1 實驗材料與儀器-5 2.1.1 實驗材料-5 2.1.2 實驗儀器-5 2.2 實驗方法-5 2.2.1 樟芝菌絲體培養-5 2.2.2 光學顯微鏡觀察-5 2.2.3 孢子懸液的制備-5 2.2.4 保護劑和條件的選擇-5 2.2.5 培養方式-6 2.2.6 生物量測定-6 2.2.7 還原糖量測定-6 2.2.8 發酵動力學參數計算-6 第3章 結果與分析-7 3.1 孢子短期保存結果-8 3.1.1 保存1周后的結果-8 3.1.2 保存2周后的結果-8 3.1.3 保存4周后的結果-9 3.1.4 小結-10 3.2 循環發酵結果-11 3.2.1 分批發酵結果-11 3.2.2 5L發酵罐循環發酵結果-12 3.2.3 10L-100L發酵罐循環發酵結果-13 3.2.4 小結-13 第4章 結論與展望-15 4.1結論-15 4.2不足之處及未來展望-15 參考文獻-17 致 謝-19 |