摘要:研究不同配比的酶解液、菌絲的菌齡、酶處理的溫度和時間及其他因素對黑曲霉(Aspergillus niger)原生質體的形成量的影響，并通過正交實驗獲得了制備黑曲霉原生質體的最適條件：纖維素酶1.0%，蝸牛酶0.5%，菌齡24h，酶解溫度30℃，酶解時間2h，滲透壓穩定劑0.7 mol/L氯化鈉，此時，原生質體的形成率達到85%，采用固體單層培養法于28℃再生，再生率達48.53%。為原生質體技術改良黑曲霉的生產性能奠定了方法學基礎，并為相關霉菌原生質體的制備提供借鑒。

關鍵詞  酸性植酸酶；黑曲霉；原生質體；形成；再生；影響因素

目錄

摘要

Abstract

1 緒論-1

1.1植酸酶-1

1.1.1 植酸酶的種類-1

1.1.2 植酸酶的來源-1

1.1.3 植酸酶的性質-2

1.2原生質體的概念及制備方法-2

1.2.1原生質體的概念-2

1.2.2原生質體的制備方法-2

1.3原生質體的再生-2

1.3.1原生質體的再生-2

1.3.2原生質體的再生培養基-3

1.4 原生質體的應用與展望-3

1.4.1 原生質體的應用-3

1.4.2原生質體的展望-4

1.5本論文研究的意義和研究內容-4

1.5.1本論文研究意義-4

1.5.2本論文研究內容-5

2材料與方法-6

2.1實驗材料-6

2.1.1主要試劑-6

2.1.2主要實驗儀器-6

2.1.3 菌種-7

2.1.4 培養基-7

2.2 實驗方法-7

2.2.1 菌株培養方法-7

2.2.2酸性植酸酶酶活力測定-8

2.3 原生質體的制備-10

2.3.1 菌絲體的培養-10

2.3.2酶解，原生質體的形成-10

2.4單因素實驗優化黑曲霉原生質體的制備條件-10

2.4.1酶解時間對原生質體形成的影響-10

2.4.2酶解溫度對原生質體形成的影響-10

2.4.3滲透壓穩定劑對原生質體形成的影響-10

2.4.4菌齡對原生質體形成的影響-11

2.5 正交實驗確定原生質制備的最優條件-11

2.6原生質體的再生及再生率計算-11

2.6.1原生質體的再生-11

2.6.2 原生質體再生率計算-11

3結果與分析-12

3.1標準曲線的測定-12

3.2菌株的確定-12

3.3酶解時間對原生質體形成的影響-13

3.4酶解溫度對原生質體形成的影響-13

3.5滲透壓穩定劑對原生質體形成的影響-14

3.6菌齡對原生質體形成的影響-15

3.7 正交實驗確定原生質制備的最優條件-15

3.8原生質體釋放的形態學觀察-16

3.9 原生質體的形成率及再生率計算-17

結論-19

致謝-20

參考文獻-21