摘要:卷枝毛霉作為一種產油微生物，富含豐富的γ-亞麻酸，常常作為脂質積累的模式菌被廣泛研究。實驗發現兩株卷枝毛霉AS3.2484和卷枝毛霉CBS277.49產脂差異性顯著，前者脂肪酸比后者高一倍多，同一種屬的兩株不同菌株，有如此大的產脂差異性，本研究就是以這兩株卷枝毛霉為模式菌株，分析其脂肪積累相關酶活的變化，旨從生化途徑層面找出導致這兩株產脂差異的原因，從而進一步了解微生物脂肪積累的機理。

首先，相同條件下搖瓶發酵測量生物量和總脂肪酸含量，發現卷枝毛霉AS3.2484的生物量與總脂肪酸含量都遠遠大于卷枝毛霉CBS277.49，因此將兩株菌裝進發酵罐中進行發酵培養。

其次，通過發酵罐發酵培養所測定的生物量和總脂肪酸含量，卷枝毛霉AS3.2484仍然遠大于卷枝毛霉CBS277.49，明確卷枝毛霉AS3.2484產脂能力優于卷枝毛霉CBS277.49.

最后，測定并分析了發酵罐培養卷枝毛霉脂質合成相關酶的活性，結果表明：葡萄糖-6-磷酸脫氫酶、6-磷酸葡萄糖酸脫氫酶及ATP檸檬酸裂解酶的活性變化與胞內總脂肪酸含量的變化趨勢呈較好的相關性，是卷枝毛霉油脂積累過程中的關鍵酶。

關鍵詞：卷枝毛霉；油脂積累；酶活

目錄

摘要

ABSTRACT

第一章 緒論-4

1.1 γ-亞麻酸的研究進展-4

1.1.1 γ-亞麻酸的生物學作用-4

1.1.2 γ-亞麻酸的生物資源-6

1.1.3 γ-亞麻酸的研究現狀及應用前景-7

1.2 微生物油脂積累機制及產脂相關酶的研究概況-7

1.2.1 微生物油脂積累機制-7

1.2.2 脂質合成相關酶-8

1.2.2.1 產還原力相關酶-8

1.3 立題依據及意義-9

1.4 主要研究內容-10

第二章 材料與方法-11

2.1 實驗材料-11

2.1.1 菌株-11

2.1.2 主要儀器-11

2.1.3 主要試劑-11

2.1.4 主要試劑配制-11

2.1.5 培養基配方-12

2.2 實驗方法-12

2.2.1 培養方法-12

2.2.2 生物量的測定-12

2.2.3 發酵上清液分析-13

2.2.4 總脂肪酸含量及其脂肪酸組分分析-13

2.2.5 發酵過程中脂質積累相關酶的活性測定-14

第三章 結果與討論-16

3.1 搖瓶發酵比較兩株卷枝毛霉-16

3.1.1 兩株卷枝毛霉生物量的差異-16

3.1.2 兩株卷枝毛霉總脂肪酸含量的差異-17

3.2 發酵罐培養比較產脂高低的兩株卷枝毛霉-18

3.2.1 發酵罐中兩株卷枝毛霉生物量的差異-18

3.2.2 發酵罐中兩株卷枝毛霉總脂肪酸含量的差異-19

3.3 發酵罐中產脂高低兩株卷枝毛霉酶活的變化-20

3.3.1 蘋果酸酶-20

3.3.2 NADP+-異檸檬酸脫氫酶-21

3.3.3 葡萄糖-6-磷酸脫氫酶-22

3.3.4 6-磷酸葡萄糖酸脫氫酶-23

3.3.5 ATP檸檬酸裂解酶-24

3.3.6 NAD+-異檸檬酸脫氫酶-24

第四章 主要結論與展望-26

4.1 主要結論-26

4.2 展望-26

致  謝-27

參考文獻28