摘要：阿魏酸酯酶是能夠把阿魏酸甲酯、低聚糖阿魏酸酯及多糖阿魏酸酯中的酯鍵水解掉，游離出阿魏酸的一種酶。它可以分解木質素和植物細胞壁中的多糖-多糖之間的交聯結構。

實驗采用硫酸銨鹽析、樹脂吸附等分離純化方法，并測定了其部分酶學性質。結果表明，硫酸銨在濃度60%時分離的物質活性最大。酶反應的最適溫度為35 ℃，最適pH為6.0，酶在pH6.0～7.0范圍內活性穩定；Ca2+對酶活性有顯著的激活作用，Cu2+、Mn2+、Zn2+有一定的抑制作用；0.25 mol/L的NaCl對酶活性的激活作用最大；多種有機溶劑對酶活性有明顯的抑制作用；Triton X-100和Tween-80對酶活性有顯著的激活作用， CTAB對其有一定激活促進作用，SDS對其幾乎沒有影響。

關鍵詞：阿魏酸酯酶；分離純化；酶學性質

目錄

摘要

Abstract

1 緒論-1

1.1 阿魏酸酯酶研究現狀-1

1.1.2 阿魏酸酯酶的種類-1

1.1.3 阿魏酸酯酶的結構特征和催化機理-1

1.1.5 阿魏酸的功能-4

1.2 阿魏酸酯酶的研究意義-5

2 材料與方法-6

2.1 儀器與試劑-6

2.1.1 主要儀器-6

2.1.2 主要試劑-6

2.1.3 實驗菌種-8

2.2 培養基及配制方法-8

2.3 阿魏酸酯酶酶活測定-8

2.4 阿魏酸酯酶的分離純化-8

2.4.1 硫酸銨鹽析-8

2.4.2 透析-8

2.4.3 “724”陽離子交換樹脂吸附-9

2.4.4　DEAE-Sepharose Fast Flow離子交換層析-9

2.5 阿魏酸酯酶酶學性質研究-10

2.5.1 最適反應溫度的測定-10

2.5.2 熱穩定性的測定-10

2.5.3 最適pH值的測定-10

2.5.4 酸堿穩定性的測定-11

2.5.5 金屬離子對酶活力的影響的測定-11

2.5.6 NaCl對酶活力的影響的測定-11

2.5.7有機溶劑對酶活力的影響的測定-11

2.5.8表面活性劑對酶活力的影響的測定-11

3 結果與討論-12

3.1 阿魏酸酯酶的分離純化-12

3.1.1 硫酸銨鹽析-12

3.1.2 樹脂吸附分離純化-12

3.1.3 離子交換層析-13

3.2 阿魏酸酯酶酶學性質-13

3.2.1 最適反應溫度-13

3.2.2 酶的熱穩定性-14

3.2.3 酶的最適pH值-14

3.2.4 酶的酸堿穩定性-15

3.2.5 金屬離子對酶活力的影響-16

3.2.6 不同濃度NaCl對酶活力的影響-16

3.2.7 有機溶劑對酶活力的影響-16

3.2.8 表面活性劑對酶活力的影響-17

結論-18

致謝-19

參考文獻-20