摘要：本文采用植物基因組提取方法對山藥的基因組DNA進行提取，利用PCR技術對其18S rDNA片段進行擴增，再經連接、轉化、篩選、測序，獲得長度為1646 bp的18S rDNA序列。提交該序列至GenBank數據庫，獲得基因登錄號JF703101。分析山藥18S rDNA的基因序列，確定山藥與煙草和番茄等多種植物在分類上有很近的關系，從而對分子水平上山藥分類有了進一步了解。

關鍵詞： 山藥；18S rDNA；遺傳多樣性

目錄

摘要

Abstract

1 緒論-1

1.1 山藥與山藥產業-1

1.1.1 山藥的性質與功用-1

1.1.2 山藥產業的發展狀況-3

1.2 山藥研究進展-4

1.2.1 國內山藥研究的發展趨勢-4

1.2.2 國外研究進展-5

1.3 植物DNA與DNA序列分析-5

1.3.1 植物DNA特點-5

1.3.2 核糖體DNA結構-5

1.3.3 rDNA序列分析的應用-6

1.4 本課題相關技術與原理-6

1.4.1 植物細胞破碎方法-6

1.4.2 植物基因組DNA提取方法-6

1.4.3 基因組DNA的檢測方法-7

1.4.4 聚合酶鏈式反應原理-8

1.4.5 質粒的提取方法-8

1.4.6 感受態與轉化原理-8

1.5 目的與意義-9

2 材料與方法-10

2.1 儀器與試劑-10

2.1.1 材料與試劑-10

2.1.2 主要儀器設備-10

2.2 實驗方法-11

2.2.1 山藥基因組DNA的提取-11

2.2.2 電泳鑒定-12

2.2.3 山藥18S rDNA PCR擴增反應體系-12

2.2.4 DNA回收-12

2.2.5 構建重組載體-13

2.2.6 化學轉化-13

2.2.7 重組質粒的提取及鑒定-14

2.2.8 18S rDNA序列測定和分析-14

3 結果與討論-15

3.1結果-15

3.1.1 山藥核糖體DNA的電泳-15

3.1.2 山藥核糖體18S rDNA序列的測定-15

3.1.3 相關植物核糖體18S rDNA序列-16

3.1.4 相關植物的傳統分類-17

3.2 討論-17

3.2.1 核糖體DNA提取方法-17

3.2.2 電泳方法-17

3.2.3 山藥系統演化-18

結論-19

致謝-20

參考文獻-21