摘要：強力霉素大量不合理使用、甚至濫用造成獸藥在食品中的大量殘留，已嚴重影響到人們的健康安全。如何快速檢測成為當前急需解決的問題。但強力霉素屬小分子，只可以作為半抗原，只能與載體蛋白結合才能產生抗體誘導的能力。以強力霉素為材料，采用改進的碳二亞胺兩步法將強力霉素半抗原與載體蛋白BSA連接以制備強力霉素—牛血清白蛋白人工免疫抗原，并用同樣的方法將強力霉素與載體蛋白OVA連接以制備人強力霉素—卵清白蛋白人工包被抗原。過程中先用化學法鑒定，經紫外掃描分析和動物免疫試驗證實:對合成人工的人工抗原純化后，經過紫外分光光度計掃描結果，半抗原與人工抗原的最大吸收波長顯著不同，間接說明偶聯(lián)成功，強力霉素與載體蛋白BSA的偶聯(lián)比為3:1，強力霉素與載體蛋白OVA的結合比是4:1。經動物免疫試驗所得抗血清效價為1:10000。

關鍵詞  強力霉素；人工抗原；抗體；合成；制備

目錄

摘要

Abstract

1 緒論-1

1.1獸藥殘留現(xiàn)狀-1

1.1.1抗生素殘留-1

1.1.2農藥及重金屬等其他化學物質殘留-1

1.1.3 興奮劑殘留-2

1.2獸藥殘留的原因-2

1.2.1非法使用違禁或淘汰藥物-2

1.2.2錯誤和濫用藥物-2

1.2.3不遵守國家休藥期的規(guī)定-3

1.2.4動物屠宰前用藥-3

1.3獸藥殘留的危害-3

1.3.1毒性作用-3

1.3.2過敏反應和激素作用-3

1.3.3耐藥菌株的產生-3

1.4畜禽獸藥殘留的控制措施-4

1.4.1完善藥物殘留控制管理體系-4

1.4.2加強藥物殘留檢測工作-4

1.4.3預防畜禽發(fā)生疾病 ，要堅持預防為主的原則-4

1.4.4積極開展獸藥殘留國際合作與交流-4

1.4.5大力宣傳動物性食品獸藥殘留的危害性-5

1.5對抗生素殘留的檢測方法-5

1.5.1微生物檢測法-5

1.5.2液相色譜法和毛細管電泳法-5

1.5.3氣相色譜法-5

1.5.4免疫測定法-6

1.6本項目研究的目的、意義-6

2 材料與方法-7

2.1主要試劑-7

2.2主要儀器-8

2.3透析袋處理方法-8

2.4 磷酸緩沖液配置方法-8

2.5 實驗方法-8

2.5.1強力霉素免疫原的制備-8

2.5.2強力霉素包被原的制備-9

2.5.3 人工抗原的純化-9

2.5.4強力霉素完全抗原的鑒定-9

2.5.5小鼠免疫-11

2.5.6抗體質量評價-11

3 結果與分析-12

3.1蛋白質標準曲線制作-12

3.1.1偶聯(lián)物濃度與結合比的計算-12

3.2強力霉素與BSA和OVA偶聯(lián)物的紫外光譜分析-12

3.2.1討論-15

3.3 SDS-PAGE凝膠電泳鑒定-16

3.4 三氯化鐵化學鑒定結果分析-17

3.5動物免疫試驗結果及抗體質量評價-17

3.5.1討論-17

結論-19

致謝-20

參考文獻-21