摘要：本課題以食品生物工程實驗中心酶工程實驗室保藏的黑曲霉作為菌源，經(jīng)過液體深層發(fā)酵培養(yǎng)生產(chǎn)內(nèi)切型菊粉酶。從20株菌株中篩選出一株菊粉酶酶活最高的菌株，為編號E133131的菌株，酶活為0.66 U/mL。

對E133131菌株進行發(fā)酵培養(yǎng)基的多種營養(yǎng)條件（碳源、氮源、無機鹽）試驗，先進行單因素試驗，通過測定酶活，利用正交實驗法確定內(nèi)切型菊粉酶生產(chǎn)的最佳發(fā)酵培養(yǎng)基配方。

實驗結果表明：在碳源的利用試驗中，最佳的碳源是蔗糖（7 %）；在氮源的利用試驗中，最佳的有機氮源是酵母膏（2 %）；最佳的無機氮源是磷酸氫二氨（1 %）；在無機鹽利用試驗中，最佳無機鹽為氯化鈣（0.5 %）。

在單因素試驗的基礎上，進行三因素三水平的正交試驗，獲得最佳培養(yǎng)基配方為：牛蒡汁10 mL，蔗糖為7 %， 氯化鈉 0.5 g， 磷酸氫二鉀0.5 g，酵母膏為2%，硫酸銨 0.5 g，(NH4)2HPO4為1 %，蒸餾水 100 mL，在此配方的發(fā)酵培養(yǎng)基中進行內(nèi)切型菊粉酶的生產(chǎn)，內(nèi)切型菊粉酶的酶活為1.29 U/mL。

關鍵詞 內(nèi)切型菊粉酶；發(fā)酵培養(yǎng)基；碳源；氮源；無機鹽

目錄

摘要

Abstract

1 緒論-1

1.1 低聚果糖簡介-1

1.2 菊粉酶的簡介-1

1.2.1 菊粉酶的概念-1

1.2.2 菊粉酶的來源-1

1.2.3 菊粉酶的分類-1

1.2.4 菊粉酶的性質-2

1.2.5 菊粉酶的應用-2

1.3 本實驗研究的內(nèi)容與意義-3

1.3.1 研究內(nèi)容-3

1.3.2 研究意義-3

2 材料與方法-4

2.1 實驗材料與試劑-4

2.1.1 實驗材料-4

2.1.2 試劑-4

2.2 實驗設備與儀器-5

2.3 實驗方法-5

2.3.1 牛蒡汁的制備-5

2.3.2 培養(yǎng)基的制備-5

2.3.3 標準曲線的建立-6

2.3.4 菊粉酶酶活的測定-7

2.3.5 黑曲霉菌種的活化與篩選-7

2.4 實驗設計-7

2.4.1單因素實驗-7

2.4.2 正交試驗-7

3 結果與分析-9

3.1 標準曲線的繪制-9

3.2 酶活的測定-10

3.3 菌種的篩選-10

3.4 單因素實驗-11

3.4.1碳源利用實驗-11

3.4.2氮源利用實驗-13

3.4.3無機鹽利用實驗-17

3.5 正交試驗-19

結論-20

致謝-21

參考文獻-22