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摘要:芽孢桿菌(Bacillus) 是一種好氧或兼性厭氧產芽孢的革蘭氏陽性桿狀細菌,能產生多種抗菌活性物質,主要有肽類、脂肽類、細菌素等低分子量的抗生素和蛋白類的高分子量抗菌物質以及多種維生素等。隨著醫藥、食品、化妝品、環境治理等各個行業的發展,人們對其產生的具有抗菌活性的天然產物產生了濃厚的興趣,對這些活性成分結構的鑒定也成為科學家研究的重點。為了開發新型安全的抗菌活性物質,分離純化是其中的關鍵步驟之一。本文對芽孢桿菌產生的抗菌活性物質通過多種色譜方法進行分離純化,如采用了“724”陽離子交換樹脂吸附、SepbadexG-75凝膠過濾、DEAE纖維素陰離子交換柱層析及高效液相色譜(HPLC)層析等方法。 最終確定通過“724”陽離子交換樹脂吸附和高效液相色譜層析能夠分離出抗菌物質,抑菌效果明顯。通過DEAE纖維素陰離子交換柱層析能夠分離出有活性的組分,但抑菌效果不是很明顯。而通過SepbadexG-75凝膠過濾分離純化未能獲得有活性的物質。
關鍵詞:芽孢桿菌;抗菌活性物質;色譜;分離純化
目錄 摘要 Abstract 1 緒論-1 1.1 芽孢桿菌及其代謝物質的概述-1 1.1.1芽孢桿菌的研究現狀-1 1.1.2芽孢桿菌代謝物質的概述-1 1.2芽孢桿菌代謝物質的分類-2 1.2.1核糖體合成途徑產生的抗菌物質-2 1.2.2非核糖體合成途徑產生的抗菌物質-2 1.3 芽孢桿菌代謝物質的應用-3 1.3.1在農業上的應用-3 1.3.2在工業上的應用-4 1.3.3在醫學上的應用-4 1.3.4在水產生態環境上的應用-4 1.3.5在畜牧業上的應用-5 1.4課題的內容及目的和意義-5 2 材料與方法-6 2.1 實驗材料-6 2.1.1 主要原料與試劑-6 2.1.2 主要儀器設備-6 2.2 實驗方法-7 2.2.1 菌種活化-7 2.2.2發酵液的制備-7 2.2.3 抑菌實驗-7 2.2.4 抗菌物質的分離純化-7 3 結果與分析-10 3.1 菌株SH-1的活性檢測-10 3.2 “724” 陽離子交換樹脂吸附-10 3.3 SepbadexG-75分子篩凝膠層析-11 3.4 DEAE纖維素陰離子交換柱層析-11 3.5高相液相色譜分析-12 結論-14 致謝-15 參考文獻-16 |