摘要：本研究采用多酶分步復合水解方式制備黑豆肽，并通過大孔吸附樹脂靜態吸附，乙醇洗脫分級的方式對其進行分離純化，制得2種不同黑豆品種的混合肽及8種分離肽。采用DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力、超氧自由基清除能力、脂質過氧化抑制力四種抗氧化方法對10種肽進行抗氧化活性檢測，結果表明：隨著乙醇濃度的增大，各分離組分的抗氧化活性呈遞增趨勢，其中75%和100%的乙醇洗脫肽的抗氧化活性接近，但75%的乙醇洗脫的肽得率（25%左右）遠比100%乙醇洗脫的肽得率（6%左右）高，75%的乙醇洗脫制備黑豆肽具有更好的開發實用價值。

對幾種抗氧化方法進行相關性比較結果表明：DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力和超氧自由基清除能力三種方法所測的抗氧化值具有較高的相關性，脂質過氧化抑制力(TBARS )和其他方法的相關性則較差。

關鍵詞 黑豆肽；抗氧化活性；相關性

目錄

摘要

Abstract

1 緒論-1

1.1 黑豆概述-1

1.2 生物活性肽概述-1

1.3 大豆肽制備的發展概況-2

1.4 大豆蛋白酶解物的營養特性及生理功能-3

1.4.1 氨基酸種類多樣并且含量豐富-3

1.4.2 促進機體免疫調節-3

1.4.3 抗氧化性-3

1.4.4 降血脂和抑制膽固醇作用-3

1.4.5 其他功能特性-3

1.5 大豆肽抗氧化的研究進展-4

1.6 研究的目的及意義-4

2 材料與方法-6

2.1 實驗材料與儀器-6

2.1.1 實驗材料-6

2.1.2 主要實驗儀器-6

2.2 實驗方法-6

2.2.1 黑豆蛋白的制備-6

2.2.2 蛋白質含量的測定-7

2.2.3 黑豆蛋白的多酶復合酶解工藝-8

2.2.4 黑豆蛋白酶解物水解度的測定-8

2.2.5 肽含量的測定-9

2.2.6 DA201-C大孔吸附樹脂分離黑豆肽-9

2.2.7 黑豆蛋白酶解物抗氧化活性的測定-10

3結果與分析-12

3.1 黑豆蛋白酶解的水解度與肽含量測定結果-12

3.1.1 蛋白質含量標準曲線的制作及蛋白質含量測定結果-12

3.1.2 多酶復合水解的水解度及肽含量測定結果-12

3.2 大孔吸附樹脂分離黑豆肽各洗脫組分的抗氧化活性比較-12

3.3 抗氧化方法的相關性研究結果-14

結 論-16

致謝-17

參考文獻-18

附錄-18

1 考馬斯亮蘭試劑配制-19

2 雙縮脲法試劑配制-19