摘要：首先在單因素的基礎(chǔ)上，分別采用Box-Behnken試驗(yàn)對(duì)堿提酸沉法提取蟹味菇蛋白和中性蛋白酶酶解蟹味菇蛋白的工藝條件進(jìn)行了優(yōu)化；然后研究了酶解物的抗氧化活性。結(jié)果表明：最優(yōu)提取工藝參數(shù)為液料比11.5mL/g、提取溫度35.3℃和提取時(shí)間30.4min，在此提取條件下，得率可達(dá)到10.67%；最佳酶解工藝參數(shù)為酶濃度5.3%、pH值7.4和酶解溫度47.6℃，此時(shí)水解度為30.42%；蟹味菇蛋白中性蛋白酶酶解物在質(zhì)量濃度200μg/mL~1600μg/mL和160μg/mL~1120μg/mL范圍內(nèi)，其對(duì)DPPH自由基和羥基自由基的清除率分別為22.82%～57.64%和29.46%～87.98%，且都存在明顯的量效關(guān)系。

關(guān)鍵詞 蟹味菇蛋白；堿提酸沉；酶解；抗氧化活性

目錄

摘要

Abstract

1 緒論-1

1.1 蟹味菇概況-1

1.1.1 來(lái)源-1

1.1.2 營(yíng)養(yǎng)價(jià)值-1

1.2 蛋白質(zhì)的提取方法-1

1.2.1 堿提酸沉法-1

1.2.2 TCA-丙酮沉淀法-1

1.2.3 反膠團(tuán)萃取法-2

1.2.4 醇洗法-2

1.3 蛋白肽的制備方法-2

1.3.1 溶劑提取法-2

1.3.2 酶法-2

1.3.3 微生物發(fā)酵法-3

1.3.4 膜法分離技術(shù)-3

1.3.5 固相合成法-3

1.3.6 利用重組DNA技術(shù)合成活性肽-3

1.4 抗氧化性測(cè)定方法-3

1.4.1 FRAP法-4

1.4.2 ORAC法-4

1.4.3 TRAP法-4

1.4.4 PCL法-4

1.4.5 ABTS法-4

1.4.6 DPPH法-4

1.4.7 羥基自由基法-5

1.5 本課題的研究意義及主要研究?jī)?nèi)容-5

2 材料與方法-6

2.1 原料與試劑-6

2.2 儀器與設(shè)備-6

2.3 方法-6

2.3.1 蟹味菇蛋白的提取-6

2.3.2 蟹味菇蛋白的酶解-7

2.3.3 蟹味菇蛋白肽的抗氧化活性-8

3 結(jié)果與分析-10

3.1 蟹味菇蛋白的提取-10

3.1.1 單因素試驗(yàn)-10

3.1.2 Box-Behnken試驗(yàn)-11

3.2 蟹味菇蛋白的酶解-14

3.2.1 單因素試驗(yàn)-14

3.2.2 Box-Behnken試驗(yàn)-15

3.3 蟹味菇蛋白肽的抗氧化-18

3.3.1 對(duì)DPPH自由基的清除作用-18

3.3.2 對(duì)羥基自由基的清除作用-18

結(jié)論-19

致謝-20

參考文獻(xiàn)-21